Penetapan Kadar Amoxicillin dalam Tablet Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)

Pendahuluan

Amoxicillin adalah antibiotik beta-laktam yang sering digunakan untuk mengobati berbagai infeksi bakteri. Penetapan kadar amoxicillin dalam tablet sangat penting untuk memastikan kualitas dan dosis yang tepat dalam pengobatan. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC) adalah salah satu metode yang efektif dan akurat untuk analisis kuantitatif amoxicillin dalam sediaan tablet.

Prinsip Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)

HPLC adalah teknik analitik yang memisahkan, mengidentifikasi, dan mengukur komponen dalam campuran berdasarkan interaksi mereka dengan fase diam dan fase gerak. Dalam analisis amoxicillin, detektor UV sering digunakan untuk mengukur absorpsi amoxicillin pada panjang gelombang tertentu.

Metodologi

Bahan dan Reagen

• Standar amoxicillin murni
• Tablet amoxicillin
• Pelarut: air, metanol, asam fosfat
• Fase gerak: campuran air dan metanol dengan buffer
• Buffer (misalnya, fosfat buffer pH 4.5)

Alat

• HPLC dengan detektor UV
• Kolom C18 (atau kolom lain yang sesuai untuk amoxicillin)
• Vial sampel
• Pipet dan alat pengukur volume lainnya
• Timbangan analitik

Prosedur

1. Persiapan Larutan Standar:
   • Timbang jumlah yang tepat dari standar amoxicillin dan larutkan dalam pelarut untuk membuat larutan stok.
   • Encerkan larutan stok untuk mendapatkan serangkaian larutan standar dengan konsentrasi yang diketahui.
2. Persiapan Sampel Tablet:
   • Timbang sejumlah tablet amoxicillin yang sesuai dan hancurkan menjadi serbuk halus.
   • Timbang serbuk tablet yang sesuai dan larutkan dalam pelarut untuk membuat larutan sampel.
   • Sonikasi larutan untuk memastikan amoxicillin larut sepenuhnya, kemudian saring untuk menghilangkan partikel yang tidak larut.
3. Kondisi Kromatografi:
   • Kolom: C18
   • Fase gerak: campuran air dan metanol dengan buffer fosfat (pH 4.5)
   • Laju alir: 1 mL/menit
   • Suhu kolom: 30°C
   • Deteksi: UV pada panjang gelombang 230 nm
4. Injeksi dan Pengukuran:
   • Injeksi volume tertentu dari larutan standar dan sampel ke dalam sistem HPLC.
   • Catat kromatogram dan area puncak untuk setiap larutan standar dan sampel.
5. Analisis Data:
   • Plot kurva kalibrasi dengan area puncak vs. konsentrasi untuk larutan standar.
   • Gunakan kurva kalibrasi untuk menentukan konsentrasi amoxicillin dalam sampel tablet berdasarkan area puncak sampel.

Validasi Metode

Linearitas

• Verifikasi linearitas kurva kalibrasi dalam rentang konsentrasi yang relevan.

Akurasi dan Presisi

• Lakukan pengulangan pengujian pada sampel yang sama untuk memastikan konsistensi hasil.
• Evaluasi akurasi dengan membandingkan hasil analisis dengan nilai sebenarnya.

Spesifisitas

• Pastikan metode ini dapat membedakan amoxicillin dari komponen lain dalam tablet.

Batas Deteksi dan Kuantisasi

• Tentukan batas deteksi (LOD) dan batas kuantisasi (LOQ) untuk metode ini.

Hasil dan Diskusi

HPLC adalah metode yang akurat dan dapat diandalkan untuk penetapan kadar amoxicillin dalam tablet. Metode ini memungkinkan pemisahan yang baik dan deteksi spesifik amoxicillin, bahkan dalam kehadiran eksipien lain dalam tablet. Hasil yang diperoleh dapat digunakan untuk memastikan bahwa tablet mengandung dosis amoxicillin yang sesuai dengan spesifikasi.

Kesimpulan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC) adalah teknik yang efektif untuk penetapan kadar amoxicillin dalam tablet. Dengan validasi yang tepat, metode ini dapat digunakan sebagai alat standar dalam pengendalian kualitas produk farmasi. Hasil yang akurat dan konsisten sangat penting untuk memastikan efektivitas dan keamanan obat.